Serološka ispitivanja: vrste, upotreba

Laboratorijske dijagnoza gotovo svih zaraznih bolesti temelji se na otkrivanju protutijela u krvi pacijenta, koje su proizvedene od patogeni antigen, serološkim metodama. Otišli su u medicinskoj praksi u kasnom devetnaestom - početkom dvadesetog stoljeća.

Razvoj znanosti je pomogla definirati antigenu strukturu mikroba i kemijskim formulama njihovih toksina. Moguće je stvoriti ne samo terapeutski već i dijagnostički serum. Oni su dobiveni primjenom oslabljeni patogeni laboratorijskih životinja. Nakon nekoliko dana usisavanje krvi zečeva ili miševa pripremljene proizvoda koji se koriste za identifikaciju bakterije ili njihovih toksina pomoću serološka ispitivanja.

Izvanjske manifestacije ove reakcije ovisi o uvjetima njegove formulacije i stanju antigena u krvi pacijenta. Ako mikrobi su netopive čestice, oni riješiti, lizira, mobilizirani ili vezan u serumu. Ako su antigeni su topljivi, čini se fenomen neutralizacijom ili oborina.

aglutinacija (PA)

Serološki aglutinacija test je vrlo specifičan. To je lako izvesti i sasvim je jasno da se brzo otkriti prisutnost antigena u serumu bolesnika. Da se koristi za podešavanje Vidal reakcije (dijagnozu tifus i paratifus) i Weigla (tifus).

Ona se temelji na specifičnom interakcijom između humanih antitijela (ili aglutinini) i mikrobnih stanica (agglyutenogenami). Nakon njihove interakcije koje nastaju čestice taloga. To je pozitivan znak. Za postavljanje reakcije mogu se koristiti živ ili mrtav mikrobiološka sredstva, gljivice, protozoe, krvne stanice i somatskih stanica.

Kemijska reakcija je podijeljen u dvije faze:

1. Specifični antitijela spoj (AT) s antigenima (Ag).
2. Ne-specifično - polaganje konglomerata AG-AT, odnosno formiranje slijepiti.

Reakcijska indirektni aglutinacija (TPHA)

Ova reakcija je osjetljivija od prethodnog. Se koristi za dijagnozu bolesti koje uzrokuju bakterije, parazite, intracelularne protozoa. To je tako specifičan da može otkriti čak i vrlo niske koncentracije antitijela.

Za svoj formulaciju korištenjem pročišćenog ovčje crvene krvne stanice i crvene krvne stanice ljudskoga prethodno primili antitijela ili antigene (to ovisi o tome laboratorij želi naći). U nekim slučajevima, ljudska crvena krvna zrnca tretirana s imunoglobulinima. Serološki odgovor eritrocita se smatra važećom ako je njihov oborina došlo na dnu cijevi. Pozitivna reakcija može se reći kada stanice su raspoređeni u obliku okrenutog slova kišobrana, zauzimaju cijeli dno. Negativna reakcija je postigao kada su crvena krvna zrnca se nasele u obliku stupa ili tipke u sredini dna.

Reakcijska taloženje (RP)

Serološki reakcije ove vrste služe za identifikaciju vrlo male čestice antigene. To može biti, na primjer, proteini (ili njihovi dijelovi), spojevi proteina s lipidima ili ugljikohidrata, dio bakterija i njihovih toksina.

Serumi za reakciju dobiven je umjetno zaraze životinje, tipično zečeva. U ovoj metodi, možete dobiti apsolutno bilo taloženje serum. Skele serološki taložno sličan mehanizam djelovanja na aglutinacije. Protutijela sadržana u serumu vežu na antigene u koloidnu otopinu kako bi se dobilo velike proteinske molekule, koje su pohranjene na dnu cijevi ili na podlogu (gel). Ova metoda se smatra vrlo specifičan i može otkriti čak i u tragovima količine tvari.

Koristi se za dijagnosticiranje kugu, tularemija, antraks, meningitis i drugih bolesti. Također su uključeni u forenzični pregled.

Ispitivanje gel taloženje

Serološka ispitivanja mogu se provesti ne samo u tekućem mediju, a u agaroznom gelu. To se naziva difuzno postupak taloženja. Uz to, proučavanje sastava složenih antigene smjese. Ova metoda temelji se na kcmotaksiju antigena na protutijela, i obratno. Gel se kreću jedni prema drugima na različitim brzinama i sastanak u obliku oborina linije. Svaka linija - jedan set K-AT.

Neutralizaciju egzotoksin protuotrov (RN)

Antitoksičan serumu može neutralizirati egzotoksin koji mikroorganizmi proizvode. Na temelju tih podataka i serološkim testovima. Mikrobiologija koristi ovu metodu za titracije seruma, toksina i anatoksina, kao i njihove terapijske aktivnosti. Snaga neutralizacije toksina određuje se prema uobičajenim jedinicama - AE.

Osim toga, zbog ove reakcije mogu se utvrditi vrste ili vrste koje pripadaju egzotoksin. Se koristi u dijagnostici tetanusa, botulizma, difterije. Istraživanje se može provesti „na staklo”, te u gel.

liza reakcija (RL)

Imunološki serum, koji ulazi u tijelo pacijenta, je, osim svoje glavne funkcije pasivnog imuniteta, čak i litske svojstva. To je sposoban za otapanje mikrobiološka sredstva, stanični i stranih elemenata virus ulazi u tijelo pacijenta. Ovisno o specifičnosti antitijela uključene u serumu izolira baktericidno, citolizina, spirohetoliziny, hemolysins i druge.

Ova specifična protutijela nazivaju „dopuna”. Ona je pronađena u gotovo svim tjelesnim tekućinama, on ima složenu strukturu proteina i vrlo je osjetljiva na povećanje temperature, potresen, kiselinama i direktne sunčeve svjetlosti. No, u suhom stanju može održavati svoje litičke svojstva do šest mjeseci.

Postoje neke vrste serološke testove ovog tipa:

- bakterija Bakterioliza;

- hemoliza.

Bakterija Bakterioliza se provodi pomoću pacijentov krvni serum i specifični imuni serum sa živim klicama. Ako, onda istraživač vidi lizu bakterija, a odgovor će se smatrati kao dovoljan broj pozitivnih dopuna je prisutna u krvi.

Drugi serološki odgovor krvi da je suspenzija obrađena eritrocita u serumu koji sadrži hemolysins pacijenata koji se aktiviraju samo u prisutnosti određenog kompliment. Ako postoji, onda je laboratorij gledajući raspuštanje crvenih krvnih stanica. Ova reakcija se široko koristi u suvremenoj medicini odrediti titar komplement (tj njegov najmanji iznos izazivanja lizu crvenih krvnih stanica) u krvnom serumu, te za proizvodnju testu vezanja komplementa. Bilo je to na ovaj način provedena serološkim reakcije na sifilis - Wasserman.

fiksacije komplementa (RSK)

Ova reakcija se koristiti za detektiranje antitijela u serumu kod pacijenta od infektivnog agensa, kao i za identifikaciju pokretača antigenskog strukture.

Do ovog trenutka smo opisali jednostavan seroloških testova. RAC smatra teško reakcije, budući da je u interakciji ne dva, ali tri elementa: antitijelo, antigen i komplementa. Svojoj biti leži u činjenici da je interakcija između protutijela i antigena javlja samo u prisutnosti proteina kompliment koje se adsorbira na površini oblikovanog kompleksa K-AT.

Sami antigeni nakon dodavanja dopuna, uz značajne promjene koje ukazuju na kvalitetu reakcije. To može biti lize, hemoliza, imobilizacija, baktericidno ili bakteriostatično.

Sama Reakcija se odvija u dvije faze:

1. Formiranje protutijela s antigenom koji nije vidljiv vizualno istraživač.
2. Mijenjanje antigen pod djelovanjem komplementa. Ova faza obično može se pratiti golim okom. Ako vizualni odgovor nije vidljiv, a zatim upotrijebite dodatni indikator sustav koji omogućuje otkrivanje promjena.

sustav indikatora

Ova reakcija se temelji na vezanju komplementa. Epruvete sata nakon postavljanja RSK dodan pročišćene ovce eritrocita i serumu hemolitička ne sadržava komplement. Ako je cijev je ostalo nevezano dopuna, on će se pridružiti složeni N-at nastalu između ovce krvnih stanica i hemolizina i uzrokovati njezino oslobađanje. To bi značilo da je DGC je negativan. Ako crvenih krvnih stanica ostao netaknut, onda, prema tome, reakcija je pozitivna.

hemaglutinacijskim (RHA)

Postoje dva fundamentalno različita hemaglutinacijsko. Jedan od njih - serološko, koristi se za određivanje krvnih grupa. U tom slučaju eritrocitimakunića interakciju s antitijelima.

A druga reakcija nije vezano za serološke, budući da crvene krvne stanice reagiraju s hemaglutinina produkciji virusa. Budući da svaki uzbude djeluje samo na određene eritrocita (piletina, ovca, majmun), možemo pretpostaviti ta reakcija usko specifična.

Vedro pozitivan ili negativan odgovor, moguće je za položaj krvnih stanica u dnu cijevi. Ako oni lik izgleda obrnuti kišobran, a zatim željeni virus je prisutan u krvi pacijenta. A ako sve crvene krvne stanice formiraju kao novčić stupaca, ne postoje nepoznate patogeni.

Reakcija inhibicije hemaglutinacije (HAI)

To visoko specifična reakcija, što omogućuje da se utvrdi oblik, vrste virusa ili prisutnost specifičnih antitijela u serumu krvi pacijenta.

Svojoj biti leži u činjenici da su antitijela dodani u epruvetu koja sadrži test materijala sprečava taloženje eritrocita na antigena, čime se zaustavlja hemaglutinacije. To je kvalitativno indikacija za prisutnost specifičnih antigena u krvi u neki željeni virusa.

Reakcijska imunofluorescencija (RIF)

Reakcija se temelji na sposobnosti identificiranja komplekse s AT-AH fluorescentnom mikroskopijom nakon tretmana flyuorohromnymi boja. Ova metoda je jednostavna za korištenje, ne zahtijeva izolaciju čistih kultura i potrebno malo vremena. To je neophodno za brzu dijagnostiku zaraznih bolesti.

U praksi, ovi serološki testovi su podijeljeni u dvije kategorije: izravne i neizravne.

RIF izravno proizvesti antigen koji su prethodno obrađeni fluorescentnog seruma. I neizravno je da se lijek prvo tretira s konvencionalnim diagnosticum sadrži antitijela na željeni antigen i zatim ponovno primijeniti fluorescentni sirutke, koja je specifična za proteinima složenog K-AT i mikrobne stanice postanu vidljivi mikroskopijom.