Lančana reakcija polimeraze i njegova priroda i opseg

Lančana reakcija polimeraze (PCR) - metoda molekularne biologije, koji omogućuje otkrivanje bioloških materijala malim količinama deoksiribonukleinske kiseline (DNA), ili prije, neke od njegovih fragmenata, te ih višestruko više puta. Zatim su vizualno identificirati gel elektroforezom. Reakcija je razvijen u 1983 K. Mullis i uključeni u popis otvorenih otkrića posljednjih godina.

Koji su mehanizmi PCR

Cijeli postupak se temelji na sposobnosti nukleinskih kiselina na same repliciraju, da se u ovom slučaju održanog umjetno u laboratoriju. replikacija DNA ne može započeti bilo regiju molekule, ali samo u područjima s određenom sekvencom nukleotida - polaznih fragmenata. Da bi lančane reakcije polimeraze započela, trebamo klica (ili DNA sonde). To su kratki fragment DNA sekvenci s određenom nukleotidnom sekvencom. Oni su komplementarni (tj odgovara) početak uzorka DNA dijelova.

Naravno, za stvaranje početnice, znanstvenici moraju proučiti slijed nukleotida u nukleinske kiseline, koja je uključena u postupak. Ove DNA sonde osigurala specifičnost reakcije i njihove inicijacije. Lančana reakcija polimeraze neće ići, ako se uzorak ne naći barem jednu molekulu željenog DNA. Općenito, reakcija zahtjeva gore primera, skup toplinsku nukleotida, otporan DNA polimeraze. Potonji je enzim - katalitičke reakcije sinteze novih molekula nukleinske kiseline na osnovi uzorka. Sve su te tvari, uključujući i biološke tvari, koja je potrebna za identifikaciju DNA su kombinirani u reakcijskoj smjesi (otopina). Nalazi se u posebnom termostatu koji obavlja svoju vrlo brzo grijanje i hlađenje unutar određenog vremena - ciklusa. Oni su obično 30-50.

Kako je to reakcija

Suština je to da tijekom jednog ciklusa, a primeri su vezani na dijelove željene DNA, nakon čega ide udvostručenja enzimom. Na osnovi dobivenih DNA lancima sintetizirani u slijedećim ciklusima više i više komada identičnih molekula.

Lančana reakcija polimeraze dosljedno dobiven nakon njegove koraka. Je karakteriziran prvo udvostručuje količinu produkta tijekom svakog ciklusa grijanja i hlađenja. U drugom koraku reakcije nastaje usporavanje jer je enzim oštećena i gubi aktivnost. Osim toga, iscrpljene zalihe nukleotida i primera. U posljednjoj fazi - plato - proizvodi nisu više akumulirati što reagensi više.

Gdje se koristi

Bez sumnje, najširi lančana reakcija polimeraze program pronalazi u medicini i znanosti. To se koristi u javnom i privatnom biologije, veterine, farmacije, pa čak i ekologije. Dok potonji rade za praćenje kvalitete hrane i objekata na okoliš. Aktivno se koristi lančane reakcije polimeraze u forenzičkoj praksi potvrdili očinstvo i identifikaciju identiteta osobe. U forenzičkih znanosti, kao iu paleontologije, često ova metoda je jedini način, jer je obično dostupna za proučavanje izuzetno male količine DNA. Naravno, vrlo je široko korištena metoda nalazi se u medicinskoj praksi. On joj je potrebna u područjima kao što su genetika, zaraznih i onkoloških bolesti.